PRUEBA DE COOMB

 INTRODUCCIÓN:

- La prueba de Coombs también se conoce como prueba de antiglobulina. La prueba de Coombs busca anticuerpos que puedan adherirse a los glóbulos rojos y hacer que los glóbulos rojos mueran demasiado pronto.

- Fue descubierto por Coombs, Mourant y Race en 1945. El reactivo de Coombs es globulina antihumana.

- Se elabora mediante la inyección de globulina humana en animales, que producen anticuerpos policlonales específicos para inmunoglobulinas humanas y factores del sistema del complemento humano.

PRINCIPIO:

- Los glóbulos rojos recubiertos con complemento o anticuerpos IgG no se aglutinan directamente cuando se centrifugan.

- Se dice que estas células están sensibilizadas con IgG o complemento. Para que se produzca la aglutinación, debe añadirse al sistema un anticuerpo adicional, que reacciona con la porción Fc del anticuerpo IgG, o con el componente C3b o C3d del complemento.

- Esto formará un "puente" entre los anticuerpos o el complemento que recubre los glóbulos rojos, provocando la aglutinación.

TIPOS DE PRUEBA DE COOMB:

1. Prueba de Coomb directa

2. Prueba de Coomb indirecta

1. PRUEBA DE COOMB DIRECTA:

INTRODUCCIÓN:

- La prueba de Coombs directa se utiliza para detectar anticuerpos (IgG o C3) que se adhieren a la superficie de los glóbulos rojos. Muchas enfermedades y medicamentos pueden causar esto. Estos anticuerpos a veces destruyen los glóbulos rojos y causan anemia.

- Esta es la prueba que se realiza en la muestra de sangre del recién nacido, generalmente en el contexto de un recién nacido con ictericia. Las dos formas más comúnmente reconocidas de hemólisis mediada por anticuerpos en los recién nacidos son la incompatibilidad Rh y la incompatibilidad ABO.

PROCEDIMIENTO:

1. Prepare una suspensión al 5% en solución salina isotónica de los glóbulos rojos a analizar.

2. Con una pipeta limpia, agregue una gota de la suspensión celular preparada a un tubo pequeño.

3. Lavar tres veces con suero fisiológico para eliminar todos los restos de suero.

4. Decantar completamente después del último lavado.

5. Agregue dos gotas de suero antihumano.

6. Mezclar bien y centrifugar durante un minuto a 1500 RPM.

7. Resuspenda las células agitando suavemente y examínelas macroscópicamente y microscópicamente en busca de aglutinación.

2. PRUEBA DE COOMB INDIRECTA:

INTRODUCCIÓN:

- La prueba de Coombs indirecta busca anticuerpos que fluyen libremente contra ciertos glóbulos rojos. Con mayor frecuencia se hace para determinar si puede tener una reacción a una transfusión de sangre.

- Esta es la prueba que se realiza en la muestra de sangre de la madre como parte de sus laboratorios prenatales. Con frecuencia denominada "detección de anticuerpos", esta prueba identifica una larga lista de antígenos menores que podrían causar problemas en los recién nacidos o causar problemas en la madre si es necesaria una transfusión.

- Aproximadamente el 5% de los pacientes tienen un IAT positivo debido a anticuerpos IgG, anticuerpos IgM o ambos.

PROCEDIMIENTO:

1. Etiquete tres tubos de ensayo como T (suero de prueba), PC (control positivo) y NC (control negativo).

2. En el tubo etiquetado como T (Prueba), tome 2 gotas de suero de prueba.

3. En el tubo de ensayo etiquetado como PC (control positivo), tome 1 gota de suero anti-D.

4. En el tubo de ensayo etiquetado como NC (control negativo), tome 1 gota de solución salina normal.

5. Agregue una gota de suspensión salina al 5% de las células positivas agrupadas "O" Rho (D) en cada tubo.

6. Incubar los tres tubos durante una hora a 37 ° C.

7. Lavar las células tres veces en solución salina normal para eliminar el exceso de suero sin anticuerpos libres (en el caso de un lavado inadecuado de los glóbulos rojos, se pueden obtener resultados negativos).

8. Agregue dos gotas de suero de Coombs (suero antihumano) a cada tubo.

9. Mantener durante 5 minutos y luego centrifugar a 1500 RPM durante un minuto.

10. Resuspenda las células y examínelas tanto macroscópicamente como microscópicamente.

RESULTADOS:

1. NEGATIVO:

- Sin aglutinación de células (sin aglutinación). Esto significa que no tiene anticuerpos contra los glóbulos rojos.

2. POSITIVO:

- La aglutinación (aglutinación) de los glóbulos rojos durante una prueba de Coombs directa significa que tiene anticuerpos en los glóbulos rojos y que puede tener una afección que causa la destrucción de glóbulos rojos por su sistema inmunológico (hemólisis). Esto puede deberse a

- Anemia hemolítica,

- Leucemia linfocítica crónica o trastorno similar,

- Eritroblastosis fetal (enfermedad hemolítica del recién nacido),

- Mononucleosis infecciosa,

- Infección por micoplasma,

- Sífilis,

- Lupus eritematoso sistémico y

- Reacción a la transfusión, como una debida a unidades de sangre que no coinciden correctamente.

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